Den største private arbejdsplads i Hillerød Kommune er en afdeling af medicinalkoncernen Novo Nordisk A/S, der er førende på verdensmarkedet for medicin til diabetesbehandling. Koncernen beskæftigede i 2017 ca. 42.000 medarbejdere i 79 lande og sælger sine produkter i stort set samtlige lande i verden. I Danmark beskæftigede Novo Nordisk ca. 17.400 ansatte i 2017, hvoraf ca. 2.200 arbejdede i Hillerød. Hovedsædet ligger i Bagsværd, men virksomheden har ud over i Hillerød også store enheder i bl.a. Hjørring, Kalundborg, Gentofte og Søborg.
Novo Nordisk har siden etableringen i Hillerød i 1992 investeret flere milliarder i udbygning af produktions- og udviklingsaktiviteter dækkende ca. 90.000 m². Produktionen omfatter både diabetesprodukter og blødermedicin. Den senest igangsatte udvidelse er en påfyldningsfabrik til diabetesprodukter, der betyder yderligere 450 ansatte og ventes klar i 2019.
Ud over fabrikken i Hillerød ejer Novo Nordisk den fredede gård Favrholm syd for Favrholm Voldsted.
